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维生素B12生物合成有了新方法

维生素B12生物合成有了新方法

2023-09-04 06:00:00


  本报讯  (记者 杨晓晶)中国科学院天津工业生物技术研究所张大伟研究员带领的蛋白合成细胞工厂与微生物代谢研究团队近日在维生素B12生物合成技术开发方面取得新进展。该研究团队通过将微生物B12合成途径中24步催化反应进行模块划分,构建了体外无细胞催化合成维生素B12的技术体系,并实现了体外多酶催化体系中产量的较大提升。

  维生素B12是自然界中天然合成的最复杂的小分子化合物之一,也是高等动植物生理活动必需的化合物,它以辅酶形式在DNA合成、甲基化和线粒体代谢中发挥着重要作用。目前,维生素B12的工业生产主要依赖微生物发酵来实现。然而,以微生物为底盘合成维生素B12的方法存在菌种改造困难、发酵周期长、产物生产和菌株生长难以实现平衡等问题。

  在该研究中,为解决各个模块的组装和优化过程存在的副产物反馈抑制现象,研究团队在中间产物氢咕啉酸(HBA)合成时引入S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成反应和副产物S-腺苷高半胱氨酸(SAH)分解反应,有效缓解了反应过程中的副产物反馈抑制现象;为解决腺苷钴啉胺酸(AdoCby)合成模块的中间产物检测难问题,研究团队应用“停流检测法”,对模块中辅因子及副产物进行追踪,实现了模块反应的检测。此外,还通过构建AdoCby及相关中间产物的直接检测方法,实现了模块产物的直接检测;通过分析级联酶促反应间的相互影响,研究人员发现了反应途径中ATP使用的竞争现象,并通过引入ATP再生反应对该现象进行了缓解;针对维生素B12合成途径中辅因子种类多、数量多的特点,构建了全局辅因子再生系统,实现了体系中辅因子的部分回补,对催化体系进行了进一步的优化与提升。最终,通过组装36个酶的体外多酶催化系统,实现了以5-氨基乙酰丙酸(5-ALA)为底物合成维生素B12的体系构建,及以HBA为底物合成维生素B12的催化体系的产量提升。

  业内人士认为,该研究不仅开拓了除化学合成法、微生物合成法之外的第三种维生素B12合成方法,同时也对维生素B12合成途径的解析发挥了积极的推动作用,对构建长途径、多元素的复杂无细胞合成体系具有一定的指导意义。

 

  《》(2023年09月04日06版)

  (责编:杨晓晶)

 

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作者: 新领创业

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